Skip to content

Diagnostyka noworodkowa i leczenie choroby Menkesa ad 7

3 miesiące ago

584 words

W rodowodzie kwadraty oznaczają samce, koła oznaczają samice, a diament wskazuje cztery poronienia. Stałe symbole oznaczają dotkniętych członków rodziny, otwarte symbole nienarażone członków rodziny i znaki kreskowania znanym nośnikiem mutacji. W panelu B test komplementacji drożdży rozróżnia allele ATP7A. Wzór plateru (zgodnie z ruchem wskazówek zegara od pozycji godziny 12) obejmuje zmutowaną delecję ccc2 z transportem drożdży; delecja ccc2 transformowana zwykłym allelem ATP7A (typu dzikiego); delecja ccc2 z transformacją próbną z pustym wektorem; delecja ccc2 transformowana zmutowanym allelem ATP7A niosącym delecję egzonów 20 do 23; delecja ccc2 transformowana zmutowanym allelem ATP7A, G666R; oraz delecja ccc2 transformowana zmutowanym allelem ATP7A, N1304S (związanym z typowym zespołem potyliczno-robaczkowym, łagodnym wariantem choroby Menkesa i stosowanym jako kontrola pozytywna22). Szczepy drożdży wysiano na cztery różne pożywki: normalny ekstrakt drożdżowo-peptonowo-dekstrozowy (YPD), syntetyczny azot drożdżowy (YNB) uzupełniony o miedź (medium wystarczające do miedzi ), YNB suplementowany żelazem (medium wystarczające dla żelaza ) ) i YNB o ograniczonej zawartości miedzi i żelaza. Wszystkie szczepy rosły na YPD, pożywki wystarczające do miedzi i wystarczające dla żelaza (dane nie pokazane), podczas gdy na podłożach o ograniczonej zawartości miedzi i żelaza rosły tylko gatunek dziki, G666R i N1304S, co wskazuje na aktywność transportu miedzi związaną z tymi komórkami. allele. Allel typu dzikiego wykazuje najbardziej stabilny wzrost. Allel z delecją egzonów 20 do 23 nie dopełnił szczepu nokautowego, co wskazuje na brak resztkowej aktywności transportu miedzi. Panel C pokazuje konfokalne obrazy mikroskopowe fibroblastów od normalnego samca niemowlęcia i od Pacjenta 2 (delecja eksonu 1) wybarwiony przeciwciałem C-końcowym do mysiej ATP7A (czerwony) i markerem Golgiego CD-ceramid NBD (zielony). W normalnych kontrolnych fibroblastach (typu dzikiego) występuje bezpośrednie nakładanie się sygnałów ATP7A i Golgiego (panel Merge), podczas gdy w komórkach z delecją egzonu nie ma widocznego sygnału ATP7A. Del oznacza delecję i ex ekon. Eksperymenty RT-PCR z użyciem fibroblastowego RNA od Pacjenta 5 i jego głęboko upośledzonego starszego brata ujawniły, że głównym skutkiem IVS9, DS, +6 T . G jest pominięcie egzonu 9 (Figura 3A). Exon 9 zawiera 226 pz sekwencji ATP7A, która koduje dwa pierwsze segmenty transbłonowe w produkcie genu.9 Oprócz tego zmutowanego transkryptu, wykryliśmy małą ilość odpowiednio splicowanego transkryptu u obu pacjentów.
Zastosowaliśmy test komplementacji drożdży22 w celu zbadania skutków delecji eksonów 20 do 23 i G666R na funkcję ATP7A. Wyniki wskazują, że G666R częściowo uzupełnia delecję ccc2 z nokautem transportowym S. cerevisiae, co wskazuje na pewną resztkową funkcjonalną zdolność przenoszenia miedzi w tym zmutowanym allelu (Figura 3B). Przeciwnie, zmutowany allel z delecją egzonów 20 do 23 nie dopełnił delecji ccc2, co sugeruje brak jakiejkolwiek resztkowej funkcji transportu miedzi. Transformacja delecji ccc2 zmutowanym allelem (N1304S) uprzednio zaznaczonym jako mająca resztkową aktywność ATPazy miedzi22 i z pustym wektorem, odpowiednio, jako kontrola pozytywna i negatywna, dała oczekiwane wyniki (Figura 3B).
Egz. z ATP7A jest niekodowany; Delecja tego eksonu może obejmować promotor ATP7A i tym samym wyeliminować ekspresję genu.28 Wykorzystaliśmy analizę immunohistochemiczną i mikroskopię konfokalną do oceny ekspresji ATP7A w hodowanych fibroblastach od Pacjenta 2, który miał delecję eksonów i nie wykrył wykrywalnego sygnału (fig. 3C).
Dyskusja
Niemowlęta z chorobą Menkesa, które rozpoczęły leczenie miedzią w okresie noworodkowym, miały lepsze przeżycie niż niemowlęta, które później rozpoczęły leczenie
[hasła pokrewne: ocet na świerzb, list pożegnalny do alkoholu, choroba menkesa ]

0 thoughts on “Diagnostyka noworodkowa i leczenie choroby Menkesa ad 7”

Powiązane tematy z artykułem: choroba menkesa list pożegnalny do alkoholu ocet na świerzb